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標(biāo)題: 細(xì)胞計(jì)數(shù)板如何計(jì)數(shù)？ [打印本頁(yè)]

作者: aa3344 時(shí)間: 2024-11-5 15:45
標(biāo)題: 細(xì)胞計(jì)數(shù)板如何計(jì)數(shù)？
　　細(xì)胞計(jì)數(shù)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中的基本技術(shù)，用于確定樣品中活細(xì)胞的數(shù)量。細(xì)胞計(jì)數(shù)板（也稱為血球計(jì)數(shù)板或Hemocytometer）是一種常用的工具，通過顯微鏡下觀察特定區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量來推算整個(gè)樣本中的細(xì)胞總數(shù)。以下是如何使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的步驟：
　　1.準(zhǔn)備工作
　　清潔與消毒：首先確保細(xì)胞計(jì)數(shù)板、吸管、蓋玻片等器具干凈無污染。
　　制備樣品：將待測(cè)細(xì)胞懸液稀釋到適當(dāng)濃度，通常為了便于計(jì)數(shù)，濃度應(yīng)在每毫升幾百至幾千個(gè)細(xì)胞之間。
　　2.加樣
　　使用微量移液器或滴管，小心地在細(xì)胞計(jì)數(shù)板的一個(gè)或多個(gè)小格上加入一定體積的細(xì)胞懸液，然后用蓋玻片輕輕覆蓋，避免產(chǎn)生氣泡。
　　3.計(jì)數(shù)
　　將細(xì)胞計(jì)數(shù)板置于顯微鏡下的載物臺(tái)上，并調(diào)整顯微鏡至合適的放大倍數(shù)，一般為400x或1000x。
　　觀察細(xì)胞計(jì)數(shù)板上的網(wǎng)格，每個(gè)大格子內(nèi)有更細(xì)的小格子，選擇其中的幾個(gè)單元格進(jìn)行計(jì)數(shù)（例如，四個(gè)角的大格和中央大格），記錄每個(gè)小格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)目。
　　4.數(shù)據(jù)處理
　　根據(jù)所選小格的數(shù)量和體積，計(jì)算平均值。
　　使用公式計(jì)算總體積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量。例如，如果一個(gè)大格表示的是0.1mm3的體積，而你在四個(gè)大格中共計(jì)數(shù)了N個(gè)細(xì)胞，則總體積V(單位為ml)內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量=N/(大格數(shù)*小格體積)*總體積分母*稀釋倍數(shù)。
　　5.檢查活力（可選）
　　如果需要檢查細(xì)胞活力，可以采用染色法，如臺(tái)盼藍(lán)排除法，將死細(xì)胞染色后，只計(jì)數(shù)未被染色的活細(xì)胞。
　　注意事項(xiàng)：
　　在操作過程中要盡量減少樣品暴露于空氣中的時(shí)間，以防干燥影響細(xì)胞狀態(tài)。
　　避免強(qiáng)力擠壓蓋玻片導(dǎo)致細(xì)胞破壞。
　　確保每次實(shí)驗(yàn)前對(duì)計(jì)數(shù)板進(jìn)行徹底清洗和干燥，以免殘留物質(zhì)干擾結(jié)果。
　　正確使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板不僅可以得到準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)，而且對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)和分析具有重要指導(dǎo)意義。

作者: 設(shè)備在線 時(shí)間: 2024-11-20 08:32
感謝你的分享，很有意義。

作者: 我記性越來越差 時(shí)間: 2024-11-21 21:32
讓我學(xué)到了很多新東西。

作者: 你是胖虎嗎 時(shí)間: 2025-11-1 04:21
這個(gè)討論真是讓我大開眼界，學(xué)到了很多。

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