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赭曲霉毒素A免疫親和柱是一種用于分離和富集赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,簡稱OTA)的高效實驗工具。以下是對其的詳細介紹:
一、原理 赭曲霉毒素A免疫親和柱的原理基于抗原與抗體的特異性結合。該柱子內部固定有針對赭曲霉毒素A的特異抗體,這些抗體能夠與樣品中的赭曲霉毒素A發生特異性結合,從而將目標分子從混合物中選擇性地吸附到柱子上。
二、結構 赭曲霉毒素A免疫親和柱通常由柱體、固定基質(如瓊脂糖凝膠、硅膠等)和特異抗體組成。特異抗體通過共價鍵結合到固定基質上,形成免疫親和層析介質。
三、應用 赭曲霉毒素A免疫親和柱主要用于定性、定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的赭曲霉毒素A。它可作為樣品前處理步驟,用于高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質譜聯用儀(GC-MS)、酶聯免疫吸附法(ELISA)等分析方法的前處理。
四、操作步驟 1.柱子預處理:取出免疫親和柱,恢復至室溫,并去除柱內保存液。 2.樣品處理:將含有赭曲霉毒素A的樣品進行提取、過濾和稀釋等預處理步驟,以便將目標分子從其他成分中分離出來。 3.結合:將處理好的樣品液緩慢滴加到免疫親和柱上,使赭曲霉毒素A與固定在柱內的抗體發生特異性結合。 4.淋洗:用適量的淋洗液(如真菌毒素清洗緩沖液、蒸餾水等)洗滌柱子,以去除非特異性結合的成分。 5.洗脫:使用適當的洗脫緩沖液(如甲醇、乙酸甲醇等)將赭曲霉毒素A從免疫親和柱上解離下來,以便進一步的分析或使用。
五、注意事項 1.操作**:由于赭曲霉毒素A具有毒性,操作時應穿戴好手套、口罩等防護用品,避免與身體直接接觸。 2.柱子保存:免疫親和柱應在規定的溫度和濕度條件下保存,避免陽光直射和高溫環境。 3.有效期:不要使用過了有效日期的免疫親和柱,以確保實驗結果的準確性。 4.樣品處理:樣品的收集和取樣過程應嚴格按照相關標準進行,以保證樣品的代表性和準確性。
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